早發現早處置，番茄潰瘍病檢測試紙條作用及操作規范

番茄潰瘍病是由密執安棒桿菌密執安亞種引起的毀滅性維管束細菌性病害，被列為重要檢疫性病害，可侵染番茄幼苗、莖稈、葉片、果實，造成植株萎蔫枯死、果實鳥眼斑，嚴重時田塊絕收，帶菌種子和種苗是病害遠距離傳播的主要源頭。傳統PCR、分離培養等檢測手段對設備、人員技術要求高，耗時久，很難直接在大棚、田間開展大批量初篩。番茄潰瘍病檢測試紙條（貨號ISK44001/0025）作為膠體金免疫層析快速檢測產品，無需專業儀器，5分鐘即可獲得初步檢測結果，廣泛用于溫室、大田、種苗基地、基層植保站點的現場快速篩查，為病害早發現、早隔離、早處置提供技術支撐。  

一、產品主要作用  

第一，實現田間、溫室現場快速初篩，降低病害擴散風險。該試紙條突破實驗室條件限制，不需要離心機、PCR儀等大型設備，植保人員、種植技術人員可直接在種植現場采樣檢測。針對疑似萎蔫、莖稈開裂、維管束褐變、果實鳥眼斑的番茄植株，采集葉片、葉柄、莖稈組織，經過樣本搗碎浸提后進行試紙檢測，短時間判斷植株是否存在Cmm病原菌，能夠及時把帶菌病株識別出來，盡早拔除銷毀，阻斷病菌雨水、農事操作傳播，避免病害在棚室內爆發流行。尤其對于種苗繁育基地，可以對幼苗進行批量抽檢，篩查隱性帶菌的無癥狀種苗。Cmm存在潛伏期，部分植株攜帶病菌但暫時沒有表現發病癥狀，傳統肉眼觀察很容易漏檢，試紙條可以檢出部分帶菌但表觀健康植株，從源頭減少帶病種苗流通風險，契合植物檢疫預檢需求。  

第二，適配多類型植物樣品檢測，拓展病害監測維度。試紙條檢測樣本包含番茄葉片、葉柄、莖稈、果柄等植株組織，也可以用于種子浸提液的初步篩查，兼顧成株、幼苗不同生育階段樣本檢測。在病害調查工作中，可用于不同地塊多點采樣，快速對比不同棚室、不同品種發病帶菌情況，為農戶調整輪作、農事管理、消毒方案提供參考依據。在基層植保、農業技術推廣工作中，降低檢測門檻，普通農技人員經過簡單培訓就可以獨立完成整套檢測流程，提升一線病害監測效率。  

第三，作為實驗室精準檢測的前置篩選工具，節約檢測成本。試紙條屬于免疫快速篩查手段，陽性結果僅為推定陽性，不能直接作為仲裁判定依據，試紙陽性樣品，再送實驗室開展PCR、病原菌分離培養、致病性測定等確認試驗；大量試紙陰性樣本可直接排除，減少實驗室樣本處理數量，節省試劑、人力與時間成本，提升整體檢測工作效率。  

需要明確，試紙條檢測原理是識別病原菌胞外多糖抗原，不是直接檢測完整菌體，存在一定交叉反應可能性，部分近緣棒狀桿菌、土壤來源的少數雜菌可能出現非特異性陽性，所以它定位是初篩工具，不能直接替代標準實驗室鑒定結果，不能單憑試紙陽性就大規模銷毀種苗，需要進一步復核確認。  

二、使用注意事項  

（一）試紙儲存與有效期管理  

試紙條需要妥善保存，未開封整套試劑建議2?8℃冷藏儲存；試紙的原裝試劑管內部帶有干燥劑，每次取用試紙之后，必須立刻擰緊管蓋密封，防止試紙接觸空氣吸潮，受潮會造成線條模糊、結果失效，整管報廢。短暫運輸、短時間室溫放置密封完好情況下，性能不受明顯影響，但禁止長期高溫暴曬存放。使用前核對產品有效期，超過有效期試紙禁止使用，過期試紙免疫抗體活性下降，會出現控制線不顯現、假陰性等異常現象。不可以把不同批次試紙條混合使用，配套提取緩沖液、提取袋需要使用原廠配套耗材，更換其他緩沖液容易造成檢測失敗。  

（二）樣品采集環節關鍵要點  

取樣工具剪刀、刀片必須消毒，不同植株取樣之間要做消毒處理，避免人為造成樣本交叉污染，帶來假陽性。優先選擇病株維管束部位，莖稈樣本選取節間褐變部位，葉片選取病健交界組織，不要選取干枯壞死的組織，壞死組織中病原菌已經大量降解，容易出現假陰性結果。采樣后盡量盡快完成檢測，樣品不可長時間常溫放置；如不能立刻檢測，樣品低溫暫存，避免細菌大量增殖或者菌體死亡，影響檢測準確度。采樣要有代表性，病害存在植株體內分布不均現象，輕度發病植株病菌主要集中在下部莖稈，上部葉片有可能檢測為陰性，懷疑發病時，建議同一植株采集莖、葉柄多部位重復檢測，防止漏檢。土壤沾附在葉片表面時，采樣后盡量擦拭沖洗干凈再提取，土壤中部分微生物會引發非特異性反應，造成可疑假陽性信號。  

（三）實驗操作過程規范  

將植物樣品放入專用提取袋內，隔著袋壁使用鈍物充分碾壓搗碎，使植物組織汁液充分釋放到緩沖液中；試紙條只能把下端樣品端垂直浸入提取液，浸入深度不能超過試紙標識的白色標線，浸入過深，液體漫過檢測區，會直接導致測試無效，控制線不出現，整次檢測作廢。試紙保持垂直狀態，不要平放、傾斜浸泡。嚴格把控判讀時間，反應時間5?15分鐘讀取結果；超出30分鐘之后再觀察出現的條線沒有判讀效力，試紙干燥后析出線條屬于非特異性痕跡，不能作為陽性判定依據。  

結果判讀規則：只出現上方控制線，檢測線無條帶，判定陰性；控制線、檢測線同時出現條帶，判定推定陽性；控制線沒有出現，無論檢測區有無線條，本次檢測無效，需要更換試紙重新檢測。  

（四）結果解讀與后續處置注意事項  

試紙條陽性屬于推定陽性，不等于確診番茄潰瘍病。出現陽性結果，應重新采集樣本重復試紙檢測，同時送實驗室開展分子生物學或者分離培養確認試驗，不能僅憑試紙結果直接作為檢疫執法、大規模鏟除植株的依據。試紙陰性也不能100%排除病害：當植株體內病菌濃度低于試紙檢出下限、樣品選取部位病菌少、樣品壞死降解、操作失誤等情況，都可能出現假陰性。高度懷疑田間發病，但試紙檢測陰性時，應更換取樣部位、重復多次檢測，必要時送實驗室復核。  

操作全程做好空白對照與陰陽性質控，條件允許時同步做陽性、陰性對照，判斷試紙系統是否工作正常。實驗完畢后，提取袋、殘余病株樣本按照病害廢棄物處理，集中銷毀，不要隨意丟棄，防止人為擴散病原菌。  

（五）人員與安全注意事項  

操作人員操作前后做好手部清潔消毒，防止樣本交叉污染；檢測廢棄物含原細菌，不可隨意丟棄到大田環境。試紙僅供體外植物樣本檢測，不可用于人、動物樣本檢測。整套操作盡量避免強光直射，在散射光條件下判讀結果，強光環境下容易看錯條帶，造成判讀誤差。  

三、總結  

番茄潰瘍病Cmm檢測試紙條優勢就是快速便攜，適配田間、溫室現場大批量初篩，在番茄育苗、大田病害監測、產地預檢中發揮重要作用，但它是免疫快速篩查產品，存在交叉反應、檢出限限制，有固有的檢測局限性。實際應用中嚴格遵守儲存、采樣、操作、判讀全部注意事項，區分“推定陽性”和“確診陽性”，初篩陽性樣品務必開展實驗室復核，將快速試紙篩查和傳統實驗室鑒定手段結合起來，才能夠準確做好番茄潰瘍病監測預警，科學指導番茄種植病害防控工作，減少潰瘍病帶來生產損失。